1998年，参演小我第一部电影作品《美少年之恋》从而正式进入演艺之路；同一年，凭着参演文艺电影《玻璃之城》提名为第18届香港电影金像奖最佳新演员。2001年，主演文艺电影《游园惊梦》。2003年，第一次担任监制并主演了惊悚片《妖夜回廊》，凭着这部影片首次提名第40届台湾电影金马奖最佳男主角。2004年，因参演动作片《新警察故事》中大悍匪关祖这一角色受到广大观众的关注，并凭着这一角色获得第41届台湾电影金马奖最佳男配角奖。2005年，凭着动作片《旺角黑夜》首次提名第24届香港电影金像奖最佳男主角。
吴彦祖的形象非常的英俊阳光、并且演技十分出色，自幼练习武术的他在许多动作电影中都有精湛的表现。无论是主角还是配角、正派反派亦或是亦正亦邪，吴彦祖都愿意去尝试，也能够胜任每一个内心丰富的角色人物。吴彦祖不会轻易被定型，他不单戏路更加广泛，也令观众们对他一向保持必然的新鲜感。
